• <th id="suosu"></th>

  • <dd id="suosu"></dd>

    ?
    技術服務

    Crispr基因敲除細胞系構建主要實驗項目服務

    作者:admin 來源:本站 發布時間: 2017-10-31 21:34  瀏覽次數:
    購買進口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 www.imeiweixian.com
    Crispr基因敲除細胞系構建主要實驗項目服務
    序號 服務項目 具體描述 單價(元) 實驗周期 備注
    2 Crispr引物設計 每個基因設計2-3對引物 300 4天 包含引物設計、合成費用
    3 gRNA質粒構建 一對引物退火,用T4連接酶將其連接到gRNA載體中 900 1周 包含載體酶切、引物退火、T4連接、轉化涂板
    4 gRNA質粒提取 從菌液中提取gRNA質粒,測序 1200 3天 包含菌液接種、質粒提取,測序驗證,無內毒素質粒提取
    5 細胞培養 目的細胞的培養,以備細胞轉染等操作 400 1周 包含細胞培養、傳代及凍存
    6 慢病毒包裝與感染 在HEK293T細胞中將構建好的cas9-gRNA表達質粒包裝成慢病毒后感染目的細胞 3000 2周 包含慢病毒包裝效率的優化
    7 抗性篩選 利用抗性篩選轉染陽性的細胞 3800 1-2周 包含抗性使用濃度和時間的優化
    8 測序檢測敲除效率 細胞基因組提取,PCR出靶序列,測序檢測 1300 1周 包含基因組提取,目的基因PCR和測序
    9 分單克隆細胞 將抗性篩選后得到的細胞利用有限稀釋法分到96孔板中,獲得單克隆細胞 1400 2天 包含細胞消化、細胞計數、96孔板分單克隆
    10 單克隆細胞培養傳代 培養96孔板中的細胞,挑選由單個細胞長成的細胞群落傳代擴增 5000 3-5周 包含單克隆細胞挑選、細胞傳代擴增
    11 基因敲除細胞株鑒定 WB檢測單克隆細胞中目的基因的剩余表達量 1600 1-2周 包含20個單克隆細胞株樣品制備,WB檢測目的基因和內參
    12 基因敲除細胞系凍存 擴增并凍存基因敲除細胞系 1000 1周 包含細胞擴增及凍存
    總計(元)
      19900 6-8周 /
    說明:Crispr敲除實驗有一定的風險,我們會先做項目分析,比較有把握才會開展后續實驗,一般會選取2-3個靶點來做,抗性篩選完后確定效率最高的來篩選單克隆細胞株

     

     

    北京畢特博生物技術有限責任公司

    http://www.imeiweixian.com

    400熱線:400-833-9299

    電話:010-82015225

    傳真:010-62015131

    聯系人:陳娉樺

    QQ:358411186

    E-mail:chenph1989@163.com

    購買進口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 www.imeiweixian.com

    所有試劑均用于科研 ???? 北京畢特博生物技術有限責任公司 版權所有
    服務熱線:010-82015225/400-833-9299 | 傳真:010-62015131 | E-mail:info@bitebo.com
    京ICP備05028556號-1 ??京公網安備11010802008747??

    欧美成人性爱视频_精品绿奴视频在线一区_97成人无码免费视频_97成人无码免费视频

  • <th id="suosu"></th>

  • <dd id="suosu"></dd>